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3.12: Agar hierro con triple azúcar - Biología

3.12: Agar hierro con triple azúcar - Biología



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El agar hierro con triple azúcar (agar TSI) es otro ejemplo de agar para pruebas múltiples. También prueba la producción de sulfuro de hidrógeno a partir de aminoácidos. El rojo de fenol es el indicador de pH utilizado en este medio de prueba.

Procedimiento

  1. Obtenga una inclinación de TSIA.
  2. Con una aguja de inoculación, apuñale a su organismo asignado en la culata de la inclinación TSIA. A medida que retira la aguja de inoculación, arrástrela en forma de zigzag por la superficie de la parte inclinada del tubo.
  3. Incubar la inclinación durante 24-48 horas.
  4. Después del período de incubación, registre cualquier cambio en el tubo.

Interpretación

Revise los resultados de la fermentación de carbohidratos y observe lo siguiente:

  • Color inclinado / color a tope: el color inclinado indica la fermentación de lactosa y / o sacarosa.
  • El color a tope indica la fermentación de la glucosa.
  • Producción de gas: El agar muestra burbujas o puede partirse.
  • Producción de H2S: H2La formación de S está indicada por un ennegrecimiento del medio.

Izquierda: A / A, H2S +, Gas +
Derecha: K / A, H2S +, Gas +


Biology 2420 sirve como introducción al mundo microbiano. Este curso es una combinación de trabajo teórico y de laboratorio. Incluye las características básicas de bacterias, hongos, algas y virus. Además, este curso se centra en las enfermedades humanas, los organismos que las provocan, su tratamiento y prevención. Una sección de laboratorio acompaña a este curso que se enfocará en la identificación de bacterias. El trabajo de laboratorio incluirá microscopía, técnicas de cultivo bacteriano y tinción básica. Este curso está diseñado para estudiantes de enfermería, pero es aplicable a todas las ciencias de la salud aliadas. Introducción a la anatomía, Introducción a la fisiología o Anatomía y fisiología 1, con una calificación mínima de C o mejor (o equivalente con laboratorio) es un requisito previo para esta clase. Además, cada estudiante debe demostrar competencia en lectura, escritura y matemáticas según lo determinado por la prueba COMPASS o ASSET, o por la prueba THEA a nivel estatal, o proporcionando una transcripción oficial de otra universidad.

Libros de texto / materiales requeridos

Autores: Michael J. Leboffe & amp Burton E. Pierce

  • Gafas de seguridad o anteojos con una clasificación de seguridad de ANSI Z87.1.
  • Camisa vieja o delantal / abrigo de laboratorio
  • Rotulador Sharpie o vidrio
  • Cuaderno de laboratorio

Curso Racional

El curso racional incluye: (1) preparar adecuadamente a los estudiantes para los programas de ciencias de la salud en ACC y el trabajo profesional, (2) desarrollar sus habilidades de pensamiento crítico y resolución de problemas, y (3) reforzar sus habilidades para seguir instrucciones y cumplir plazos. Se esperan habilidades y competencias específicas de los estudiantes que completen con éxito este curso, que incluyen:

y capacidad de la secta para identificar diversas enfermedades y sus posibles causas

y capacidad de la secta para observar fenómenos y registrar y analizar datos

y capacidad de la secta para inferir a partir de datos

y habilidad de la secta para demostrar habilidades de pensamiento de alto nivel

y capacidad de la secta para resolver problemas

y capacidad de la secta para obtener información de gráficos

y habilidad de la secta para manipular equipos

y capacidad de la secta para trabajar eficazmente en grupo

y capacidad de la secta para trabajar de forma segura en un entorno de laboratorio

y capacidad de la secta para seguir instrucciones

Metodología instruccional

Los anuncios y las notas de las conferencias se publicarán en Blackboard. Publicaré conferencias actualizadas en Blackboard el lunes de la semana en que estén programadas. Para tener éxito en este curso, deberá leer el libro de texto además de las notas de la clase y completar las tareas publicadas en Blackboard o entregadas en clase. Algunas conferencias se asignarán como tarea para permitir la discusión y las asignaciones de pensamiento crítico en clase. Todas las tareas y las puntuaciones de los exámenes se publicarán en Blackboard, pero las calificaciones finales no se calcularán con Blackboard.

Quiero que tengas éxito en esta clase. Haré lo que pueda para ayudarte. Sin embargo, espero que usted también haga su parte. Espero que lea las asignaciones del libro de texto, que haga preguntas cuando no entienda el material, que me visite durante el horario de oficina para aclarar notas de clase u otras cosas con las que pueda necesitar ayuda y que dedique una cantidad razonable de tiempo a estudiar. No espere poder abarrotar para la prueba. La microbiología es como un nuevo idioma y se necesita tiempo para poder aprenderlo. Estudia con un grupo de estudio de forma regular.

Objetivos del Curso

Los objetivos comunes del curso de Introducción a la microbiología están disponibles en el sitio web del departamento.http://www.austincc.edu/biology/commoncourseobjectives.html.

Conferencias en clase y en casa

He proporcionado copias de mis notas de clase en Black Board para ayudarlo a tomar notas durante la conferencia y estudiar para los exámenes. La mayoría de las conferencias se cubrirán en clase, pero hay algunas conferencias de & ldquoAt Home & rdquo designadas en el folleto & ldquoLecture Schedule & rdquo. Se le pedirá que lea la lectura asignada en el libro de texto y haga un seguimiento con las notas de clase que acompañan a la lectura asignada. Las preguntas de tareas en clase a menudo cubrirán el material que se encuentra en las conferencias de & ldquoAt Home & rdquo, por lo que le conviene completar la conferencia antes de completar una tarea en clase.

Tareas y asignaciones en clase

Habrá asignaciones en clase a lo largo del semestre. Tendrán un valor aproximado de 25 a 40 puntos. La mayor parte de la tarea se completará en clase y se entregará al final de la clase. No hay recambios disponibles para estas asignaciones a menos que se lo haya comentado previamente.

Se darán tareas para el hogar de vez en cuando fuera de la clase. El número de asignaciones y su valor se determinará de acuerdo con las necesidades de cada clase. Cada asignación de tarea tendrá un valor aproximado de 10 a 20 puntos cada una. La tarea debe entregarse antes de las 12:00 am (medianoche) de la fecha límite. Puede enviar asignaciones de tareas por correo electrónico o entregarlas en papel. Las fechas de vencimiento se darán el día en que se asignen las tareas.

Considere las asignaciones de lectura de libros de texto incluidas en el programa de conferencias como parte de su tarea asignada. Le ayudará a comprender el material discutido en clase y contribuirá a su éxito en esta clase.

Estudios de caso (si hay tiempo)

Es posible que le den varios estudios de casos breves para completar durante el semestre por un valor aproximado de 10 a 20 puntos cada uno. Cada estudio de caso incluirá la descripción de una enfermedad que puede encontrar en un entorno clínico. Su trabajo será determinar la enfermedad y redactar una justificación. Los estudios de caso deben entregarse antes de las 12:00 am de la fecha límite. Puede enviarme los estudios de caso por correo electrónico o entregarlos en papel. Las fechas de vencimiento se darán el día en que se asigne el estudio de caso.

Habrá 4 exámenes magistrales por valor de 100 puntos cada uno. Se compondrán de una combinación de ensayo de respuesta corta, resolución de problemas, diagramación, opción múltiple, verdadero / falso y emparejamiento. Cada examen será una combinación de pruebas escritas y por computadora a través de una pizarra y se administrará en el Centro de Pruebas. Las fechas de los exámenes se enumeran en el programa de conferencias, pero están sujetas a cambios leves. Cualquier cambio se anunciará en clase.


Horario de laboratorio. Biol 2420. Schrass. Verano 2021
semana fecha Libro de laboratorio Tema páginas del manual de laboratorio Microbugz Tutores / videos de Pearson & # 39s MicroLab Contenido bb
Semana 1 2-jun Introducción al laboratorio y los microorganismos y la seguridad 1-7 Laboratorio de introducción Seguridad en el laboratorio de microbiología
Ex. 1-1 Comparación de agentes limpiadores de manos pag. 17 - 20 Folleto de lavado de manos ninguno Práctica 1: Laboratorio de lavado de manos
Ex. 2-1 Ubicuidad de los microorganismos pag. 57 - 62 Ubicuidad de microorganismos (bajo crecimiento mirobiano) ninguno Práctica 1: Ubicuidad de los microorganismos
Semana 2 7-jun Ex. 2-2 (Folleto colonial y celular) Morfología de la colonia pag. 63 - 74 Ficha de datos bacterianos: morfología celular y colonial. Laboratorio de características culturales ninguno Práctica 1: Morfología colonial
Ex. 1-3 (Folleto de vacunación sobre Microbugz) Transferencias asépticas pag. 29 Folleto de Inoculación Transferencia aséptica de bacterias Práctica 1: Técnica aséptica
Ex. 2-4 Patrones de crecimiento en caldo pag. 79 Patrones de crecimiento en el laboratorio de caldo Práctica 1: Patrones de crecimiento en caldo
Ex. 1-4 Método de aislamiento de placas de rayas Fig. 6.9 I el libro de texto pag. 41 Laboratorio de placas de racha Técnica de placa de racha Práctica 1: Paté de racha para aislamiento
9-jun Ex. 3-1 Introducción al microscopio óptico pag. 143 - 160 Folleto de uso y cuidado del microscopio. Introducción al laboratorio de microscopio óptico Microscopy Penguin Prof Chater 4 en el libro de texto Práctica 1: Microscopía
Ex. 3-3 Examen de microbios eucariotas pag. 161 Laboratorio de examen de microbios eucariotas
Ex. 3-11 Montaje húmedo pag. 221 Laboratorio de montaje en húmedo y caída colgante
Semana 3 14-jun Ex. 3-5 (tabla de tinción) Manchas simples pag. 185 Folleto de la tabla de manchas. Laboratorio de Manchas simples. Hoja de datos bacterianos: morfología colonial y celular Preparación del frotis Práctica 1: Mancha simple
Ex. 3-6 (Folleto del protocolo de tinción) Mancha negativa pag. 191 Folleto de StainProtocols. Laboratorio de tinciones negativas Práctica 1: Mancha negativa
Ex. 3-7 Tinción de Gram pag. 195 Laboratorio de tinción de Gram Tinción de Gram Práctica 1: Tinción de Gram
Ex. 3-10 Tinción de endosporas pag. 215 Laboratorio de endosporas Práctica 1: Tinción de endosporas
Ex. 3-8 Catalizador de manchas ácido-resistentes U pag. 203 Laboratorio de tinción ácido-resistente Tinte ácido rápido Práctica 1: Tinción Acid Fast
Ex. 5-6 Prueba de catalasa pag. 321 Laboratorio de pruebas de catalasa Práctica 3: Staphylcoccus y Micrococcus Lab: Prueba de catalasa
16-jun hoy no hay laboratorio para que los estudiantes puedan tomar el examen I
Semana 4 21-jun Ex. 3-13 (Hoja de datos de Morph Unknown) Comience el video de Morfological Unknown en la clave dicotómica pag. 229 Hoja de datos y laboratorio morfológico desconocido pag. 119 diagrama de flujo de clave dicotómica del libro de texto Documentos del curso: Proyectos: Desconocido Proyecto 1 - Morfológico Desconocido
23-jun Ex. 2-7 Medio fluido de tioglicolato pag. 95 Laboratorio de caldo de tioglicolato fluido B. Subtilus E. coli S. pyrgenes Práctica 1: Medio fluido de tioglicolato
Ex. 2-8 Tarro anaeróbico / tarro de vela pag. 99 Tarro anaeróbico. Laboratorio de tarros de velas Práctica 1: Tarro anaeróbico
Ex. 5-28 (Folleto de motilidad sobre Microbugz) Prueba de motilidad pag. 437 Folleto de motilidad Práctica 1: Moility Media
Ex. 3-12 Tinción de flagelos (portaobjetos preparados) pag. 225 Laboratorio de tinción de flagelos Práctica 1: Tinción flagelar
28-jun El laboratorio no se reunirá para que los estudiantes puedan tomar el Examen II
Semana 5 30-jun Ex. 3-9 Catalizador de tinción de cápsula U pag. 211 Laboratorio de tinción de cápsulas Práctica 1: Tinción de cápsula
Importancia de las pruebas bioquímicas Práctica 2: ¿Por qué son importantes las pruebas bioquímicas en microbiología?
Ex. 5-13 Hidrólisis de almidón (SA) pag. 361 Práctica 2: Hidrólisis del almidón
Ex. 5-17 Hidrólisis de gelatina pag. 379 Laboratorio de pruebas de gelatinasa Práctica 2: Hidrólisis de gelatina
Ex. 5-14 Hidrólisis de ADN (DNasa) pag. 367 Laboratorio de pruebas de ADNasa Práctica 2: Hidrólisis de ADNasa
Ex. 5-16 Hidrólisis de caseína (SMA) pag. 375 Laboratorio de pruebas de Casease Práctica 2: Hidrólisis de caseína (agar de leche desnatada)
Ex. 5-15 Hidrólisis de lípidos (TRB) pag. 371 Laboratorio de pruebas de lipasa Práctica 2: Hidrólisis de lípidos
Ex. 5-3 Catalizador de caldo rojo de fenol U. pag. 303 Laboratorio de rojo fenol Práctica 2: Prueba de fermentación de carbohidratos y rojo fenol
5 de julio Vacaciones no hay clases programadas
Semana 6 7 de julio IMViC Indol, rojo de metilo, Vogues Proskauer Práctica 2: IMViC
Ex. 5-20 Medio SIM pag. 393 Laboratorio medio SIM Reducción de azufre Producción de indol y movilidad Práctica 2: SIM
Ex. 5-4 Pruebas de rojo de metilo y Voges-Proskauer pag. 311 Laboratorio de pruebas de rojo de metilo y Voges-Prokauer Práctica 2: MRVP
Ex. 5-9 Prueba de citrato pag. 339 Laboratorio de pruebas de citrato Práctica 2: Prueba de citrato
Ex. 5-8 Prueba de reducción de nitrato pag. 333 Laboratorio de pruebas de reducción de nitratos Práctica 2: Prueba de reducción de nitrato
Ex. 5-18 Hidrólisis de urea (caldo) pag. 383 Laboratorio de pruebas de ureasa Práctica 2: Hidrólisis de urea
Laboratorios entéricos Práctica 3: Folleto diario del laboratorio entérico
Ex. 5-7 Prueba de oxidasa pag. 327 Laboratorio de pruebas de oxidasa Práctica 3 Laboratorio entérico: Prueba de oxidasa
12 de julio Ex. 5-21 Agar hierro triple azúcar (TSI) / Agar hierro Kligler pag. 401 Laboratorio de agar hierro triple azúcar
Semana 7 Ex. 5-11 Prueba de descarboxilación pag. 349 Laboratorio de prueba de descarboxilasa Práctica 3 Laboratorio entérico: Prueba de descarboxilasa
Ex. 5-12 Prueba de fenilalanina desaminasa pag. 357 Laboratorio de pruebas de fenilalanina desaminasa Práctica 3 Laboratorio entérico: Prueba de fenilalanina desaminasa
Ex. 4-6 Agar azul de metileno de eosina (EMB) pag. 267 Laboratorio de agar azul de metileno de eosina Practical 3 Enteric Lab & quot Eosina Metilema Agar Azul
Ex. 4-7 Agar entérico Hektoen (HE) pag. 273 Laboratorio de agar entérico Hektoen Práctica 3 Laboratorio entérico: Agar entérico Hektoen
14-julio Ex. 4-5 Agar MacConkey (MAC) pag. 259 Laboratorio de agar MacConkey Práctica 3: Laboratorio entérico: Agar MacConkey
19-julio laboratorio no se reunirá para que los estudiantes puedan tomar el Examen III
Semana 8 Laboratorio de Staphlococcus y Micrococcus Práctica 3: Folleto diario de laboratorio de estaflococos y micrococos
Ex. 5-25 Agar de sangre pag. 423 Laboratorio de agar sangre Práctica 3: Staphlococcus y Micrococcus Lab: Blood Agar
Ex. 4-1 Agar de alcohol feniletílico (PEA) pag. 237 Laboratorio de agar de alcohol feniletílico Práctica 3: Staphlococcus y Micrococcus Laboratorio: Agar de alcohol feniletílico
Ex. 4-4 Agar sal manitol (MSA) pag. 253 Laboratorio de agar sal manitol Práctica 3: Staphlococcus y Micrococcus Lab: Manitol Salt Agar
Streptococcus y Enterococcus Práctica 3: Instrucciones para Streptococcus y Enterococcus lag Práctica 3: Streptococcus y Enterococcus: Folleto diario
Ex. 4-3 Prueba de bilis-esculina pag. 249 Práctica 3: Streptococcus y Enterococcus: folleto de bilis esculina y prueba de bilis esculina
Ex. 5-24 Prueba de susceptibilidad a la bacitracina (y discos de optoquina A y ampP) pag. 417 Práctica 3: Streptococcus y Enterococcus: agar Glood con disco A y disco P
21-julio Prueba de tolerancia a la sal al 6,5% (Folleto de tolerancia a la sal) Prueba de tolerancia a la sal al 6,5% Práctica 3: Streptococcus y Enterococcus: folleto de tolerancia a la sal y prueba de tolerancia a la sal
26-julio Ex. 5-31 (Ficha técnica mixta desconocida) Comenzar Mixto Desconocido pag. 457 Ficha técnica mixta desconocida video al final de PP
Semana 9 28-julio Laboratorio de identificación bacteriana del HHMI El enlace al laboratorio virtual en línea y la hoja de trabajo del amplificador se encuentra en BB Semana a semana.
Laboratorio de inmunología del HHMI
Semana 10 no hay laboratorios esta semana para que los estudiantes puedan tomar el examen IV y el final, así como completar sus hojas de datos de Mixed Unknown

OBJETIVOS DEL CURSO DE CONFERENCIA

EN BIO 2420 los alumnos aprenderán a:

1. Analice la teoría de los gérmenes de la enfermedad y su desarrollo.

2. Discutir los procedimientos asépticos para la preparación de medios y materiales para el cultivo y crecimiento de microbios.

3. Enumerar y diferenciar entre los diferentes grupos de organismos incluidos para su estudio en microbiología.

4. Discutir y distinguir entre tipos de células eucariotas y procariotas.

5. Analice la adquisición y utilización de energía por parte de los microbios y la función de las enzimas en las actividades celulares.

6. Discutir el metabolismo microbiano, incluidas las vías anabólicas y las vías catabólicas glucolíticas, fermentativas y respiratorias.

7. Discutir la química fundamental de los ácidos nucleicos con respecto al principio de complementariedad, la replicación del ADN, el código genético, la síntesis de proteínas, la regulación metabólica y la reproducción celular.

8. Discutir la genética microbiana, incluidos, entre otros, los medios de reproducción sexual versus asexual y la transformación, transducción y conjugación en bacterias.

9. Discutir los métodos utilizados en biotecnología aplicados a los microbios, incluido el papel de los microbios y la biotecnología en la microbiología industrial, las industrias farmacéutica y alimentaria, y la microbiología sistemática y de diagnóstico.

10. Discutir las relaciones simbióticas, incluidas las relaciones comensales, mutualistas y parasitarias entre huéspedes y microbios.

11. Discutir los procesos de las enfermedades, las estructuras celulares, las actividades metabólicas y genéticas y los agentes biológicos y químicos empleados por los microbios para colonizar, infectar, invadir y causar enfermedades en los huéspedes.

12. Discuta los procesos, tanto inespecíficos como específicos, empleados por los huéspedes para resistir el ataque de enfermedades infecciosas.

13. Discutir los principios y métodos de diagnóstico de enfermedades, identificación de agentes causantes de enfermedades y seguimiento y enumeración de enfermedades en todo el mundo.

14. Discutir los signos, síntomas, etiología, curso, prevención, control, diagnóstico y tratamiento de las enfermedades infecciosas más comunes de todos los sistemas de órganos del ser humano.


Texto principal

Métodos

Fuente de animales

Los cerdos enfermos eran propiedad de agricultores individuales, que se comunicaron con el Laboratorio de Biología Biomédica y Molecular Animal de la Universidad de Udayana para informar sobre enfermedades y mortalidad en su porqueriza. Acordaron que sus animales enfermos y muertos se incluyeran en el estudio. Las granjas estaban ubicadas en la provincia de Bali (Tabla 1).

Durante enero a julio de 2018, 30 sospechosos S. suis Se registraron casos. Los criterios de inclusión fueron enfermedad aguda con al menos un signo clínico de trastorno neurológico, coloración rojiza de la piel y artritis. Los animales no fueron tratados con antibióticos.

A los animales recién muertos se les practicó la necropsia. Los órganos con lesiones patológicas claras se recogieron en medio de transporte Stuart (CM0111 Oxoid) y formalina tamponada. El aislamiento y la caracterización bioquímica se realizaron de acuerdo con el protocolo estándar [16]. Los tejidos de un animal se combinaron y extrajeron. La suspensión se sembró en una placa de agar sangre de oveja desfibrinada al 5%. La placa se incubó a 37 ° C durante 18-24 h. Algunas colonias sospechosas se tiñeron con Gram y se cultivaron en medio de motilidad de indol sulfuro y agar hierro con triple azúcar. Otras pruebas fueron catalasa, oxidasa, citrato, rojo de metilo, Voges-Proskauer (VP), pruebas de glucosa y lactosa. Se inyectaron tres colonias sospechosas para separar caldo de soja tríptico (Sigma Aldrich MFCD00132536) y se incubaron a 37 ° C durante 18-24 h. El ADN se aisló usando chelex-100 al 10% (Biorad, CA) [17, 18]. Los fragmentos del gen de la glutamato deshidrogenasa (GDH) y de la proteína de recombinación / reparación (recN) se amplificaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizando conjuntos de cebadores específicos publicados para S. suis [19, 20]. Los fragmentos de GDH y recN se secuenciaron mediante Apical Scientific Sequencing (Malasia) usando un método automático de terminación de cadena. La serotipificación se realizó mediante PCR para detectar la cps1I gen para los serotipos 1 y 14 y el cps2I gen para 2 y 1/2 como se recomienda [21].

El tejido se procesó y se tiñó con tinción con hematoxilina y eosina (H & ampE) según un protocolo publicado [22].

Resultados

De 30 casos, 8 fueron indicativos de S. suis y mostraron colonias pequeñas y no hemolíticas que eran Gram positivas con apariencia de formación de cadenas de coco. Solo los casos positivos se describen con más detalle en este manuscrito. Los datos epidemiológicos y clínicos de los casos presuntamente positivos se presentan en la Tabla 1. Los signos clínicos más frecuentes fueron: coloración rojiza de la piel, anorexia, exudado nasal, diarrea, cojera, exudado ocular, letargo, articulaciones inflamadas, escalofríos, debilidad, tos, falta de apetito, depresión, disnea, temblor, fiebre y mocos. Los animales tenían entre 3 y 12 meses de edad. Los casos eran de las regencias de Denpasar, Gianyar, Tabanan y Karangasem.

Los resultados de la tinción de Gram y las pruebas bioquímicas de las colonias sospechosas de los ocho sospechosos S. suis Las infecciones se presentan en la Tabla 2. Todos los aislamientos fueron Gram (+), forma de coco, de cadena corta y positivos en ácido inclinado, catalasa y lactosa, pero negativos en la prueba VP.

Después de la electroforesis de los productos de PCR (no mostrados), las muestras positivas mostraron una única banda de alrededor de 700 pb para GDH y 350 pb para recN. Las secuencias de GDH de cinco aislamientos de S. suis de nuestro estudio eran idénticos. El resultado de la explosión mostró un porcentaje de identidad (PID) del 99,09% para los aislados humanos de Bali Indonesia como se publicó anteriormente [10]. Las secuencias de recN de dos aislamientos muestran una PID del 100% para los aislamientos humanos, mientras que los otros dos tienen cada uno un 98,5%. Tras la serotipificación por PCR, se confirmó que dos aislamientos eran del serotipo 2 o 1/2. Dos cps2I Las secuencias de animales aislados en nuestro estudio son completamente idénticas a las de los aislados humanos [10]. El GenBank Acc. No. de GDH, recN y cps2I para el serotipo 2 o 1/2 son MN334770 – MN334774, MN520294 – MN520297 y MN520292 – MN520293, respectivamente.

En la figura 1 se muestra un panel de imágenes histológicas de casos confirmados. Las histopatologías de los casos confirmados fueron similares con diversa gravedad. Las imágenes prominentes fueron congestión en el cerebro, meningitis, bronconeumonía, endocarditis, miocarditis, pericarditis, erosión y enteritis a lo largo del tracto gastrointestinal con evidente agotamiento de las placas de Payer, hepatitis hemorrágica y glomerulonefritis, así como agotamiento linfoide, hemorragia y acumulación de células inflamatorias. en el bazo. La infiltración de células inflamatorias dominantes en esos tejidos fue de neutrófilos y macrófagos.

Imágenes histopatológicas de varios tejidos de confirmado S. suis infección en casos de cerdos en Bali, Indonesia, 2018. Panel a12 si el cerebro y las meninges muestran meningitis a34 son tejidos pulmonares que muestran bronconeumonía b12 ¿El miocardio muestra endocarditis? b34 si el miocardio muestra pericarditis c12 si el hígado muestra congestión y hepatitis c34 si el intestino muestra enteritis hemorrágica con agotamiento de los parches de Payer d12 si el riñón muestra glomerulonefritis hemorrágica d34 son bazo que muestra infiltración perifolicular de células inflamatorias y hemorragia teñida con H & ampE. Los aumentos en las columnas 1 y 3 son × 100 Las columnas 2 y 4 son × 400

Discusión

Confirmamos que S. suis presenta y causa enfermedades en los cerdos en Bali. Los casos humanos confirmados en el Hospital de Referencia de Bali [10] deben haberse originado en cerdos. Streptococcus suis la meningitis es una meningitis bacteriana zoonótica adquirida en la comunidad global [1, 2, 4]. La bacteria tiene una importancia adicional en Asia, ya que los brotes en humanos están relacionados con las prácticas tradicionales de consumo de carne de cerdo [5, 6]. La práctica de consumir un manjar de cerdo crudo con sangre cruda también es común en Bali.

En este estudio, seleccionamos cuidadosamente los casos sospechosos, especialmente aquellos de casos agudos sin antecedentes de medicación antibiótica. Los casos ocurrieron en cerdos menores de 1 año. A pesar de que S. suis puede aislarse de cerdos enfermos y sanos a distintas edades [23], la manifestación clínica parece más frecuente en animales jóvenes [24]. Un estudio en Canadá [25] mostró que S. suis se aisló con mayor frecuencia de cerdos de entre 5 y 10 semanas.

Registramos signos clínicos en nuestros casos que involucraban muchos órganos del sistema nervioso central, respiratorio, urogenital y circulatorio y del tracto gastrointestinal. Signos clínicos registrados de S. suis La infección en la bibliografía puede ser de hecho multiorgánica. Los signos pueden ser pirexia, falta de apetito, depresión, secreción nasal, disnea, temblores, convulsiones, falta de coordinación, posturas inusuales (como sentarse como un perro), incapacidad para pararse, remar, opistótonos, convulsiones, nistagmo, enfermedades de la piel, hinchazón. extremidades y muerte [26]. En algunos casos, la enfermedad se vuelve per-aguda y termina con una muerte súbita sin signos evidentes [26]. Aunque la septicemia y la meningitis son las manifestaciones más llamativas de la enfermedad, se han notificado endocarditis, neumonía y artritis [27]. Otro artículo de revisión también informó que los síndromes de enfermedad causados ​​por S. suis en los cerdos incluyen artritis, meningitis, neumonía, septicemia, endocarditis, poliserositis, abortos y abscesos [28]. En una infección experimental reciente, los cerdos afectados presentaron signos clínicos de anorexia, depresión, fiebre, ojos vidriosos, mucosas enrojecidas, síntomas nerviosos graves (descoordinación, postración lateral, chapoteos, opistótonos, convulsiones y cojera en las extremidades posteriores) [29].

Nuestros casos sospechosos procedían de todas las regencias de la provincia de Bali. Sin embargo, los casos confirmados procedían de cuatro regencias, a saber, Tabanan, Denpasar, Gianyar y Karangasem. Considerando que Bali es una pequeña isla de 5.600 km 2 con una alta densidad de población (http://www.baliprov.go.id/v1/geographi) y entendiendo el libre movimiento de animales en la provincia, asumimos que S. suis se distribuye por toda la provincia. Las tasas de morbilidad, mortalidad y letalidad en nuestro estudio fueron del 18,7%, 8,4% y 44,9%, respectivamente. Tasas de morbilidad, mortalidad y letalidad de S. suis en los cerdos varían [30]. Por lo tanto, asumimos que nuestra observación sobre la epidemiología del caso es plausible.

Nuestros datos microbiológicos confirmados S. suis. La tinción de Gram, la formación de cadenas y la caracterización bioquímica muestran que los aislamientos identificados fueron Gram (+), coco con uva o cadena corta. Todos fueron inclinados a ácido, catalasa y lactosa positivos, mientras que la prueba de VP fue negativa. S. suis es un coco bacteriano grampositivo encapsulado que se presenta individualmente, frecuentemente en pares u ocasionalmente en cadenas cortas [3]. La mayoría de las cepas son alfa-hemolíticas en placas de agar sangre bovina y ovina después de 24 h de incubación a 37 ° C [3]. Se utilizan cuatro pruebas para una presunta identificación de S. suis, es decir, sin crecimiento en agar NaCl al 6,5%, una prueba de VP negativa y producción de ácido en los caldos de trehalosa y salicina [25, 31]. La prueba VP es fundamental para diferenciar S. suis de otro Estreptococo especie [15].

La confirmación final se realizó mediante PCR de GDH y recN. Ambos fragmentos de genes se proponen como un sistema de reclasificación S. suis o como un sistema de PCR específico para S. suis [19, 20]. Hemos establecido el sistema para S. suis detección a partir de muestras humanas y animales en la Universidad de Udayana, Bali. El resultado de la explosión de GDH mostró un PID del 99,09%, mientras que cuatro secuencias de recN mostraron PID del 98,5% y el 100% en aislamientos humanos de Bal [10]. Tras la serotipificación por PCR, dos aislamientos resultaron positivos con conjuntos de cebadores para el serotipo 2 o 1/2, pero no los del serotipo 1 y 14. En nuestro laboratorio solo había dos conjuntos de cebadores disponibles. Las secuencias legibles eran idénticas a las S. suis serotipo 2 y 1/2 Cps2I gen Ref. [21].

Aunque seleccionamos cuidadosamente los casos con criterios de inclusión de casos sospechosos que eran agudos y tenían al menos un signo clínico de trastorno neurológico, coloración rojiza de la piel y artritis, así como sin antecedentes de tratamiento antibiótico, solo 8 de 30 casos sospechosos se confirmaron como S. suis infección. Los animales no fueron tratados con antibióticos. Los casos negativos pueden haber sido causados ​​por otros agentes infecciosos como Haemophilus parasuis, pseudorrabia o Escherichia coli [32].

Los cuadros histológicos destacados fueron congestión en el cerebro y meningitis, bronconeumonía, miocarditis, erosión y enteritis a lo largo del tracto gastrointestinal, hígado y riñón hemorrágicos. La infiltración de células inflamatorias dominantes en esos tejidos fue neutrofílica. Hallazgos macroscópicos y microscópicos de S. suis incluyen uno o más de poliserositis fibrinosa, bronconeumonía fibrinosa o hemorrágica, meningitis purulenta, necrosis miocárdica, miocarditis focal y endocarditis valvular [30]. Además, en China se ha encontrado meningoencefalitis, una lesión llamativa [29]. La histología de la meningitis en un caso (fig. 1, panel A1-2) se asemeja a la meningitis descrita por ese grupo.

Este estudio fue el resultado de una vigilancia pasiva en la que los propietarios se comunicaron con nuestro laboratorio informando enfermedades y mortalidad en sus porquerizas. El estudio no investigó el vínculo de los casos animales con las infecciones humanas. Se debe realizar una vigilancia activa para determinar los factores de riesgo generales y dilucidar el vínculo entre los animales aislados y los casos humanos. El hecho de que las secuencias de GDH de los aislados animales no sean idénticas a las de los aislados humanos y la variación de recN y el serotipo confirmado de 2 o 1/2 en dos de los ocho aislados amplía nuestro conocimiento de que las bacterias circulantes pueden variar en la provincia. Esto debe mapearse ya que beneficiará la comprensión de la transmisión humana.

En conclusión, Streptococcus suis se ha confirmado en cerdos enfermos en Bali, Indonesia. Se confirmó que dos aislamientos eran del serotipo 2 o 1/2. Se necesita más investigación para dilucidar los factores de riesgo de infección humana y para trazar un mapa de la distribución de S. suis en Indonesia. El fragmento de GDH o recN podría usarse para mapear infecciones en Indonesia. Se pueden desarrollar vacunas utilizando cepas inactivadas [33] para reducir las pérdidas económicas y el riesgo de infección humana, incluso entre viajeros nacionales e internacionales.


2.3 Clasificación de heridas quirúrgicas

La lesión quirúrgica ha sido clasificada en 4 clases: Tabla 2.3 Clasificación de la herida quirúrgica Clase I Limpia Una lesión limpia de agente secreto en la que no se encuentra enrojecimiento y no se ingresa en el terreno respiratorio, alimentario, venéreo o limpio. Además, las lesiones limpias se cierran principalmente y, si es necesario, se drenan con drenaje cerrado.

Las lesiones quirúrgicas incisionales que siguen a una lesión no penetrante (contundente) deben incluirse en esta clase si cumplen con los estándares. mancha. Específicamente, las operaciones que afectan la porción de tierra biliosa, el apéndice, la vagina y la orofaringe se incluyen en esta clase, siempre que no se encuentren motivos de infección o una interrupción importante en la técnica. Adicionalmente, operaciones con interrupciones importantes en técnica infértil (p. Ej.

gramo. , masaje cardíaco desabrochado) o derrames grandes del terreno gastrointestinal, y los rasguños en los que se encuentra fiebre, enrojecimiento no purulento se incluyen en esta clase. entrañas perforadas. Esta definición sugiere que los seres que realizaban la infección posoperatoria estaban presentes en el campo operatorio antes de la operación (Alicia J. Mangram, abril de 1999).

Se ha demostrado que una cifra de factores relacionados con el paciente y los factores relacionados con el procedimiento en análisis univariados o multivariados actúan sobre el peligro de las ISQ Tabla 2.4 Factores de peligro que afectan la SSI Factores relacionados con el paciente Factores relacionados con el procedimiento Edad, p. Ej. edad avanzada y edad extrema Posición nutricional, p. ej.

desnutrición y pérdida de peso reciente Grado de azúcar en sangre no controlado, p. ej. Diabetes Mellitus Fumar Carnosidad Posición inmune alterada, p. Ej. VIH / SIDA, uso crónico de esteroides, quimioterapia / radioterapia antigua Duración de la estancia preoperatoria en la enfermería Infección coexistente en otra parte de la estructura orgánica Alcoholismo Colonización con microorganismos (Staphylococcus aureus peculiar) Cáncer Duración del chaparral quirúrgico Asepsia de la piel Afeitado preoperatorio Preparación del tegumento preoperatorio Preparación del aire antimicrobiano Esterilización de instrumentos quirúrgicos Material extraño en el sitio quirúrgico Drenajes quirúrgicos Técnica quirúrgica Hemostasia infructuosa Fracaso para matar la lesión del tejido infinito muerto (Alicia J. Mangram, abril de 1999) En armonía con la encuesta de 1996, muestra que la hipotermia perioperatoria leve, que es común durante una cirugía mayor, puede hacer avanzar la cirugía. -infección de la herida al disparar la vasoconstricción termorreguladora, que disminuye la tensión del O hipodérmico (ANDREA KURZ, mayo de 1996). Los grados reducidos de O en el tejido perjudican la muerte violenta oxidativa por neutrófilos y disminuyen la fuerza de la lesión en curación al reducir la deposición de colágeno (ANDREA KURZ, mayo de 1996). La hipotermia además de alterar el mapa inmunológico directo (ANDREA KURZ, mayo de 1996).

Sin embargo, todavía faltan información clínica que respalde que la temperatura de la estructura orgánica del paciente aumentará el riesgo de SSI. La hiperglucemia afecta el sistema de insosceptibilidad del paciente. El nivel alto de azúcar en sangre conduce a la glicación no enzimática de proteínas que pueden desmovilizar la inmunoglobulina G (IgG) al disminuir el desarrollo detenido por complemento y aumentar la actividad de colagenasa (Hennessey et al., 1991). La hiperglucemia además de alterar los mapas de leucocitos que conducen a la detención de la quimiotaxis, alteran la fagocitosis y dificultan la actividad bactericida (Mowat y Baum, 1971 Chang, 1979).


Caracterización de los inusuales no reductores de tiosulfato Edwardsiella tarda aislado de la anguilaAnguila japonica) granjas

Raro Edwardsiella tarda, que no producen sulfuro de hidrógeno (H2S) de tiosulfato, se aisló de anguilas enfermas (Anguila japonica) en distintos lugares de cultivo. En este estudio, examinamos las características bioquímicas de H2S producción de la bacteria E. tarda. Se tomaron muestras de anguilas enfermas, junto con el agua del estanque, de ocho granjas de anguilas. Todos los aislamientos se utilizaron para la caracterización bioquímica y la secuenciación de genes fimbriales y rRNA 16S. los phs también se secuenció el gen de algunos aislamientos. H2La producción de S se analizó a partir de tiosulfato (S2O3 2 -) - o sulfito (SO3 -) -medios que contienen. El análisis de ADN identificó todos los aislados como E. tarda. De los 17 E. tarda aislados, 11 no pudieron reducir el tiosulfato a H2S, mientras que todos los aislamientos produjeron H2S de sulfito. Además, no reductor de tiosulfato E. tarda se aislaron de cuatro de las ocho granjas de anguilas muestreadas. En medios que contienen sulfato (SO4 2 -) y en medios sin tiosulfato ni sulfito, sin H2Se observó producción de S. Además, la glucosa y la galactosa parecían reprimir la reducción de tiosulfato en todas las cepas, mientras que estas diferentes fuentes de carbono no afectaron la reducción de sulfito. Esto indica que las vías de reducción de tiosulfato y sulfito no se superponen en E. tarda. Por esta razón, se debe prestar especial atención al identificar o diferenciar los productos no reductores de tiosulfato E. tarda usando H2S características de producción.

Reflejos

► Inusual Edwardsiella tarda fue aislado de anguilas japonesas enfermas. ► De los 17 E. tarda aislados, 11 no pudieron reducir el tiosulfato a H2S. ► Todos los aislamientos produjeron H2S de sulfito. ► No reductor de tiosulfato E. tarda se aislaron de 4 de las ocho granjas de anguilas muestreadas. ► Se debe prestar mucha atención al identificar esta bacteria inusual.


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